elisa試劑盒的操作需要引起注意的細(xì)節(jié)

　　elisa試劑盒的操作需要引起注意的細(xì)節(jié)
　　elisa試劑盒以固相載體吸附技術(shù)和免疫酶技術(shù)相結(jié)合建立的一種檢測方法，其操作簡便，無需特殊設(shè)備，并具有高度的敏感性和準(zhǔn)確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時間內(nèi)，于國內(nèi)外均取得了較快的進(jìn)展。
　　elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳的原因：
　　1、原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
　　解決辦法：請確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
　　2、原因：操作時間拖太久。
　　解決辦法：請在方法熟練后再進(jìn)行操作。
　　3、原因：微孔間相互污染。
　　解決辦法：加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
　　4、原因：標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
　　解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
　　5、原因：添加樣品或elisa試劑盒的操作方法不正確。
　　解決辦法：加樣品或elisa試劑盒時，吸頭請勿接觸微孔。
　　6、原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
　　解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板機洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
　　elisa試劑盒操作中應(yīng)注意以下四個方面：
　　1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
　　2．加樣一般使用加液器，在中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
　　3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導(dǎo)致elisa試劑盒錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
　　4．洗滌是elisa試劑盒操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。